Для чого роблять імуноферментний аналіз крові?

Зміст:

В останні роки в сучасних клініках все частіше почали застосовувати імуноферментний аналіз, скорочено ІФА. Раніше подібна технологія використовувалася тільки в вузькоспеціалізованих наукових лабораторіях, тепер метод став доступний кожному потребуючому в ньому. Аналіз застосовується, наприклад, для визначення таких захворювань, як сифіліс, герпес, хламідіоз, гепатит, туберкульоз та безліч інших патологій. Також його застосовують для виявлення гормональних показників і в інших цілях.

Здача імуноферментного аналізу крові

сутність аналізу

Імуноферментний аналіз можна розділити на дослідження двох основних складових: імунної та ферментної реакції.

  1. Імунна реакція - методика, що дозволяє виявити шуканий об`єкт (молекулу, клітину, мікроорганізм і т.д.).
  2. Ферментна реакція - методика, за допомогою якої розшифровується імунний аналіз.

Що являє собою проведення імунної реакції?

Даний процес відбувається в результаті з`єднання антигену і антитіла. Що це таке? Антиген - особливі молекули, що знаходяться на поверхні клітин і несуть у собі інформацію про ці клітинах. Вони підрозділяються на індивідуальні і видові.

Індивідуальний антиген - молекула, притаманна тільки одному індивідууму. Таких однакових молекул в природі не існує. Видовий антиген - молекула, притаманна тільки певного виду живих істот.

Дослідження аналізу кровіНа окремо взятій клітині знаходяться як індивідуальні, так і видові антигени. Так влаштовано для більш успішного виявлення імунними тілами чужорідних сполук.

Як саме відбувається ідентифікація і що за цим слідує? Імунне тіло зв`язується з антигеном і, якщо розпізнає його як "свого", йде. Але якщо був виявлений "чужинець", підозріла клітина негайно знищується. Імовірність помилки гранично мала.

Антитіло - молекула, розташована на поверхні імунного тіла. Саме за допомогою антитіла імунна клітина зв`язується з певною клітиною через антиген. Якщо все в порядку, відбувається роз`єднання. В іншому випадку антитіло посилає сигнал подібним собі, чужорідний антиген оточується, захоплюється, і починається процес знищення всієї клітини. Подібне явище називається імунною комплексом.



Антитіла за своєю природою є білкової структурою, їх інша назва - імуноглобуліни. Вони також поділяються на п`ять різних видів. Кожен вид зв`язується з антигенами в різних областях організму. Імуноферментний аналіз в основному має справу з двома з них.

Саме цей принцип зв`язку антитіла з антигеном, його безпомилкове розпізнавання природи об`єкта, покладено в основу імуноферментної діагностики. Точність такого аналізу досить висока.

Що собою являє процес проведення ферментної реакції?

Залежність швидкості ферментативної реакції від температуриФерментативна реакція - процес перетворення однієї речовини в іншу під дією певного ферменту. Речовина, на яке здійснюється вплив, називається субстратом.

Для кожного виду субстрату необхідно підібрати свій фермент, визначити їх спорідненість.

Речовина, отримане в результаті їх взаємодії, називається продуктом реакції. В результаті будь-який фермент викликає певного роду реакцію. Є безліч можливих варіантів. Але імуноферментний аналіз використовує лише з десяток з них.

Колориметричний метод аналізу

Колориметрія - визначення концентрації речовини по пофарбованому розчину. Для цього спеціально підбираються особливі ферменти, продуктом реакції яких є речовини, що мають забарвлення. За щільністю забарвлення розчину відповідно визначається кількість шуканого речовини. У цьому випадку існують дві залежності: пряма і зворотна. У першому випадку чим насиченішим колір розчину, тим більше в ньому певної речовини. При зворотній залежності чим більше кількості речовини в розчині, тим менше щільність забарвлення у розчину. На основі цих взаємозв`язків для зручності був створений спеціальний калібрувальний графік. Використовуючи цей графік, застосовується особливий прилад - колориметр. У нього потрібно лише раз занести всі необхідні дані, а розшифровка відбувається автоматично. З його допомогою легко визначити, чи не перевищена чи допустима норма шуканого антигену. З ферментів найбільш часто застосовується: авидин, лужна фосфатаза, пероксидаза.

Отже, як саме відбувається імуноферментний аналіз? Метод проведення аналізу ділиться на два типи: прямий і непрямий. Прямий тип імуноферментного аналізу. Для проведення аналізу до антитіл прикріпляється спеціальна мітка, той самий субстрат, з яким буде взаємодіяти фермент.



Консультація лікаря про иммуноферментном аналізі крові

  1. Береться будь-який біоматеріал: це може бути кров, зішкріб, мазок і т.д. Проба розташовується в спеціальній формі і залишається так на півгодини. За цей час антигени встигають закріпитися на її стінках. Потім туди ж додають антитіла, виведені спеціально для реакції з певним антигеном. Суміш залишається на кілька годин, щоб антитіла встигли закріпитися до антигенів. Чим більше певних антигенів, тим більше антитіл до них закріплюється.
  2. Антитіла додаються в надлишку, зайвим тілам закріпитися буде нікуди. А якщо шуканого антигену в пробі зовсім немає, то все антитіла залишаться вільними. Щоб визначити це, необхідно видалити з форми всі зайві антитіла, тобто просто добре вимити її кілька разів.
  3. Тепер найцікавіше - проведення ферментативної реакції. У промиту форму додається забарвлює фермент. Як вже було сказано, забарвлення надає реакція між введенням ферментом і прикріпленою до антитіл міткою - субстратом. Тепер весь принцип аналізу стає гранично ясним, все інше чисто професійні деталі.

Непрямий тип аналізу імуноферментного. Тут йде варіант з ускладненням, розділяється він на два етапи:

  1. Приміщення невідмічених антитіл в антигенну середу.
  2. Розміщення зазначених антитіл на невідмічені тіла.

Виходить подвійний контроль, антитіла зазвичай беруться від тварин. Незважаючи на те що процедура займає набагато більше часу, перевага віддається саме їй, в зв`язку з більшою точністю результату.

Варто відзначити, що ще фахівцями застосовується рідиннофазної і твердофазний імуноферментний аналіз крові, імунофлюоресцентним тип, але це вже глибоко професійна тема. З усіх переваг методу можна відзначити:

  1. Підвищену точність і чутливість методу.
  2. Раннє діагностування захворювання.
  3. Стеження за станом процесу захворювання.
  4. Швидкість аналізу.
  5. Зручність проведення аналізу.

З недоліків варто згадати ймовірність помилкових результатів, але це трапляється нечасто.

Аналіз застосовується при діагностиці таких захворювань, як різні гепатити, ВІЛ, герпес, сифіліс, гонорея, трихомоніаз, хламідіоз, а також онкології, алергії та імунодефіцитних синдром.

Не виключається можливість проведення аналізу на рівень різних гормонів в крові.

Всі отримані результати повинні розшифровуватися тільки кваліфікованим фахівцем, щоб уникнути можливих помилок. Подібний результат, звичайно, досить рідкісний, але не виключений.


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
Cхоже